簡要描述:寧波新芝基因?qū)雰x(智能型)SCIENTZ-2C利用電轉(zhuǎn)化來將DNA轉(zhuǎn)入感受態(tài)細胞、動植物細胞、酵母細胞中
詳細介紹
品牌 | SCIENTZ/新芝 | 價格區(qū)間 | 1-5萬 |
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產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
寧波新芝基因?qū)雰x(智能型)
寧波新芝基因?qū)雰x(智能型)
SCIENTZ-2C
產(chǎn)品說明
SCIENTZ-2C基因?qū)雰x由儀器主機、基因?qū)氡皩S眠B接線等組成。主要是利用電轉(zhuǎn)化來將DNA轉(zhuǎn)入感受態(tài)細胞、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比,基因?qū)雰x法具有高重復性,高效率、操作簡易、可定量控制等優(yōu)點,同時,電轉(zhuǎn)沒有基因毒性,已經(jīng)成為*的分子生物學基本技術(shù)。
SCIENTZ-2C基因?qū)雰x采用整機一體化設計,操作簡單,顯示直觀,主要是利用電轉(zhuǎn)化來將DNA轉(zhuǎn)入感受態(tài)細胞、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比,電轉(zhuǎn)化法具有高重復性,高效率、操作簡易、可定量控制等優(yōu)點,已經(jīng)成為*的分子生物學基本技術(shù)。
工作原理
細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細胞電穿孔 (electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導入細胞膜內(nèi)部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。
由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
細胞電轉(zhuǎn)電場圖
1 細胞膜近似絕緣體,細胞附近電轉(zhuǎn)液中電流扭曲。 2 在串聯(lián)電路中電阻越大分到電壓越大,細胞兩端電壓基本都落在兩端細胞膜上。 3 只有一個細胞端面電轉(zhuǎn)有效。 4 細胞質(zhì)內(nèi)分到電壓很小,DNA電轉(zhuǎn)進入細胞膜后馬上停止,后續(xù)靠細胞本身機制慢速擴散。 5 細胞核兩端電壓及其微小,微小的電壓又落在核膜上,核內(nèi)部*沒有電壓,電轉(zhuǎn)沒有基因毒性。 |
應用領(lǐng)域
• 細菌、酵母及其他微生物的電轉(zhuǎn)化 | • 導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結(jié)構(gòu)和功能進行研究 | • 細胞雜交、融合基因?qū)?/span> |
• 導入標記基因起到標記、指示的作用 | • 哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)染、植物組織和原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)染 |
產(chǎn)品特點
• 轉(zhuǎn)化率高 轉(zhuǎn)化時間短、重復性優(yōu)異 | • 智能儲存 可存儲實驗日志,并且自定義程序無*存儲 |
• 控制精準 采用微處理器控制的脈沖放電 | • 外形美觀 整機一體化設計,顯示直觀,操作簡單 |
實驗介紹
1、LI J等人基于高通量篩選分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制劑的研究結(jié)果。
| 2、ZHANG S Y等人發(fā)現(xiàn)和鑒定一個*的G蛋白偶聯(lián)受體119激動劑的研究結(jié)果 | |
1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌種的轉(zhuǎn)化率
品種 | 品種 | 電容 | 電阻 | 導入盒 | 轉(zhuǎn)化率 | 反饋用戶名 |
酵母 | 1200-1500V | 25µF | 200-400Ω | 2mm | 2.2-3.2*10²cfu/ug DNA | 上海肺科醫(yī)院 |
大腸桿菌 | 1250V | 5µF | 400-1000Ω | 1mm | 10 -10 cfu/ug DNA | 清華大學 |
大腸桿菌 | 1100V | 5µF | 500Ω | 1mm | 2500cfu/ug DNA | 清華大學 |
大腸桿菌 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 2500cfu/ug DNA左右 | 解放jun總醫(yī)院 |
羊細胞 | 250V | 500µF | 500Ω | 4mm | 10²cfu/ug DNA | 中科院發(fā)育所 |
畢赤酵母 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 1.8x10³cfu/ug DNA | 華東師范大學 |
枯草芽孢桿菌 | 1250V | 25µF | 400Ω | 2mm | 10²cfu/ug DNA | 華東師范大學 |
備注:因各單位實驗條件不盡相同,以上實驗參數(shù)僅供參考
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